流式細胞儀是一種基于光學原理的自動化分析工具,廣泛應(yīng)用于細胞學、免疫學、腫瘤學、分子生物學等領(lǐng)域。其主要功能是對細胞進行快速、定量、精準的多參數(shù)分析。通過流動細胞的單個顆?;蚣毎M行分析,能夠高效地獲得大量數(shù)據(jù),幫助研究者進行細胞特征的檢測、分類、計數(shù)和功能分析。

1.液流系統(tǒng):液流系統(tǒng)負責將細胞或顆粒帶入流動通道,并確保細胞單個通過激光束,避免多個細胞重疊。這一部分通常包括泵、管道、流量計等組件。
2.光學系統(tǒng):光學系統(tǒng)由激光器、透鏡、光纖、探測器等組成。激光器產(chǎn)生特定波長的激光束,照射細胞后,通過透鏡和光纖將散射光和熒光信號收集并傳輸?shù)教綔y器。
3.探測器:探測器用于收集前向散射光、側(cè)向散射光和熒光信號。常見的探測器包括光電二極管(PMT)和光電倍增管(PMT),它們能將光信號轉(zhuǎn)化為電信號。
4.計算機與軟件系統(tǒng):計算機系統(tǒng)負責接收并處理探測器傳送來的電信號,利用軟件分析數(shù)據(jù)并生成細胞的圖譜或直方圖。常見的軟件如FlowJo、FACSDiva等,提供豐富的數(shù)據(jù)分析工具。
流式細胞儀的性能特點:
1.高通量:能夠在短時間內(nèi)對數(shù)千至數(shù)百萬個細胞進行快速分析,極大地提高了實驗效率。
2.多參數(shù)分析:能夠同時分析多個細胞特性,如細胞大小、復(fù)雜度、表面標記物、細胞周期等。通過使用多重染色,可以對細胞進行深度的多維分析。
3.精確性和靈敏度:對細胞的定量分析具有很高的精度。其靈敏度高到可以檢測到單個分子或細胞的微小變化。
4.數(shù)據(jù)分析靈活性:產(chǎn)生的數(shù)據(jù)可以進行多種方式的分析,包括散點圖、直方圖、熱圖等,提供了豐富的數(shù)據(jù)展示形式,便于研究者進行深入分析。