流式細(xì)胞儀是一種廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)等領(lǐng)域的高精度儀器。通過其獨特的流體動力學(xué)設(shè)計,它能夠?qū)蝹€細(xì)胞進(jìn)行快速、精確的分析,幫助研究人員從細(xì)胞的形態(tài)、大小、數(shù)量、內(nèi)含物等多個方面獲得詳盡的數(shù)據(jù)。
1.細(xì)胞聚焦與激光照射:首先,樣品中的細(xì)胞被液流系統(tǒng)引導(dǎo)進(jìn)入狹窄的流動通道。在這一過程中,細(xì)胞會被激光聚焦為單列,確保每個細(xì)胞在通過激光束時能夠單獨被分析。
2.光散射與熒光檢測:當(dāng)激光照射到細(xì)胞時,細(xì)胞表面的不同結(jié)構(gòu)(如細(xì)胞膜、細(xì)胞核等)會散射出光。這些散射光信息能夠反映細(xì)胞的大小、復(fù)雜度等特性。與此同時,如果細(xì)胞上或細(xì)胞內(nèi)標(biāo)記了熒光染料,染料會吸收激光能量并發(fā)射熒光信號。通過檢測這些熒光信號,可識別細(xì)胞內(nèi)特定成分,如蛋白質(zhì)、核酸等。
3.信號采集與分析:通過多個光電探測器分別接收不同波長的光散射信號和熒光信號。每個信號都會被轉(zhuǎn)換為電信號,并通過計算機進(jìn)行分析。根據(jù)不同的光散射和熒光強度,能夠?qū)?xì)胞進(jìn)行分類、計數(shù)和定量分析。
流式細(xì)胞儀的優(yōu)勢:
1.高通量分析:能夠每秒對數(shù)千個細(xì)胞進(jìn)行快速分析,大大提高了實驗效率。
2.多參數(shù)檢測:通過多重標(biāo)記,可同時檢測細(xì)胞的多個特性,如大小、顆粒度、表面標(biāo)志物、細(xì)胞內(nèi)蛋白等,提供更為豐富的信息。
3.高靈敏度和高分辨率:能夠精確測量到極低濃度的標(biāo)記物,適用于低豐度分子的檢測。