流式細胞儀是一種廣泛應用于生物醫(yī)學研究和臨床診斷的分析儀器，能夠高效地對單個細胞或其他微小顆粒進行快速、定量的多參數分析。它結合了流體力學、光學原理以及計算機技術，通過對細胞的大小、顆粒結構、表面標志物等特征進行分析，能夠為研究人員提供極為豐富的信息。具有高通量、高靈敏度、實時性強等優(yōu)點，因此被廣泛應用于免疫學、腫瘤學、血液學、分子生物學等領域。
1.細胞懸浮液的制備：
細胞樣本通常需要在使用前進行分散成單個細胞懸液。這是因為細胞儀通過流動的液流將細胞逐一引入檢測通道。細胞懸液的質量對實驗結果的準確性至關重要。
2.流動通道與單細胞對齊：
采用了狹窄的流動通道，利用流體動力學原理確保細胞懸液中的細胞按順序逐一經過激光束。每個細胞通過激光照射時，都會產生不同的光散射和熒光信號。
3.光散射與熒光檢測：
通過激光束照射流動的細胞，并通過前向散射光（FSC）和側向散射光（SSC）來測定細胞的大小和形態(tài)。前向散射光代表細胞的大小，側向散射光反映細胞內部的結構復雜性，如顆粒數量和形態(tài)。
除了光散射信號，還可利用熒光標記物對細胞表面、細胞內或核內特定分子進行標記。當這些標記物被激光激發(fā)時，細胞會發(fā)出熒光信號，可精確檢測這些信號并分析不同的熒光顏色。通過對不同熒光信號的分析，研究人員可以同時檢測到多個細胞特征，如表面抗原的表達、細胞周期的變化、細胞內鈣離子濃度等。
4.信號處理與數據分析：
信號檢測系統(tǒng)能夠快速獲取每個細胞的多項數據，這些數據隨后會傳送到計算機進行處理和分析。分析軟件根據預設的參數進行數據篩選、聚類和統(tǒng)計分析，最終生成各種圖形和統(tǒng)計報告。這些數據可以幫助研究人員對細胞群體的特征進行深度分析，如不同細胞群體的分布、表型特征的差異等。
流式細胞儀的關鍵技術：
1.多參數分析：
傳統(tǒng)的細胞分析技術通常只能分析單一參數，如細胞大小或顆粒性。而細胞儀則能夠同時分析多個參數，能夠提供更為全面的細胞信息。例如，研究人員可以通過多重熒光標記分析細胞表面不同抗原的表達，從而獲取細胞的多個表型特征。
2.高通量檢測：
檢測速度極快，通常每秒鐘可對數千個細胞進行分析。這使得細胞儀能夠進行大規(guī)模的細胞分析，并且在短時間內獲得大量數據，特別適用于需要高通量分析的研究領域，如癌癥免疫治療、干細胞研究等。
3.細胞排序：
一些具備細胞分選功能。細胞分選技術能夠根據細胞的熒光標記或其他特征，將細胞分離成不同的群體并收集起來。這項技術被廣泛應用于純化特定細胞亞群、分離干細胞、免疫細胞等。
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更新時間：2025-08-19 
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